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移動(dòng)PCR實(shí)驗(yàn)室如何避免以及處理實(shí)驗(yàn)室污染

添加時(shí)間：2022-09-02 12:28 瀏覽次數(shù)：來源：移動(dòng)PCR實(shí)驗(yàn)室

PCR檢測(cè)因其高靈敏度、快速、操作方便等優(yōu)勢(shì)已經(jīng)被廣泛應(yīng)用，不過正是由于它靈敏度極高，極微量的污染源都有可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的假陽性，移動(dòng)PCR實(shí)驗(yàn)室如何避免以及處理實(shí)驗(yàn)室污染?

移動(dòng)PCR實(shí)驗(yàn)室污染分類:樣本間交叉污染,主要是在采（取）樣的過程中，由于取樣工具之間的交叉造成污染；或者在核酸提取的過程中，由于移液器、離心管等使用不當(dāng)導(dǎo)致的污染。PCR試劑的污染,主要是在PCR試劑配制過程中，由于移液器、容器、陰性對(duì)照及其它試劑被核酸模板或陽性對(duì)照污染?？寺≠|(zhì)粒的污染,在實(shí)驗(yàn)室操作中經(jīng)常會(huì)用到陽性參考品，這些陽性參考品大多數(shù)是由某些克隆質(zhì)粒制作而成，克隆質(zhì)粒在單位容積內(nèi)濃度高，不小心使用極易造成污染。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染.這是PCR反應(yīng)中最主要最常見的污染問題。因?yàn)镻CR產(chǎn)物拷貝量大，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR檢測(cè)數(shù)個(gè)拷貝的極限，所以極微量的PCR產(chǎn)物污染，就可造成假陽性結(jié)果。還有一種容易忽視，最可能造成PCR產(chǎn)物污染的形式是氣溶膠污染，在空氣與液體面摩擦?xí)r就可形成氣溶膠，據(jù)計(jì)算一個(gè)氣溶膠顆?？珊?.8萬拷貝，因而由其造成的污染是一個(gè)值得特別重視的問題。

移動(dòng)PCR實(shí)驗(yàn)室消除污染的操作步驟:購買噴壺（能夠噴出霧狀水汽的即可）；有效氯消毒片，根據(jù)要求配制不同濃度的消毒液，或者購買成品次氯酸鈉消毒液配制合適濃度消毒水；核酸氣溶膠污染清除劑。無紡布/無塵紙等。

移動(dòng)PCR實(shí)驗(yàn)室污染處理方法:清理廢液缸并且對(duì)廢液缸用有效氯含量為2000mg/L消毒水浸泡消除核酸污染；用有效氯含量為2000mg/L消毒水對(duì)移液槍進(jìn)行擦洗，關(guān)鍵部位為移液槍前端易污染部位，清潔干凈后用潔凈水再擦拭一遍；將離心管架、擴(kuò)增管架、擴(kuò)增管架底板、吸嘴盒及其他相關(guān)物品用有效氯含量為500mg/L的消毒水浸泡2小時(shí)后，用清水沖洗干凈晾干后使用；對(duì)污染區(qū)域內(nèi)的設(shè)備如擴(kuò)增儀、全自動(dòng)提取儀等，使用核酸氣溶膠污染清除劑進(jìn)行反復(fù)處理；對(duì)生物安全柜等含有空氣過濾系統(tǒng)的設(shè)備，需更換過濾網(wǎng)；用有效氯含量為500mg/L的消毒液對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)室（地板、墻面、天花板、門、窗戶等地方）進(jìn)行清潔，并且用用有效氯含量為1000mg/L的消毒水對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行噴霧消毒（重點(diǎn)部位為操作區(qū)），有效降解空氣中的氣溶膠與附著在實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面的核酸污染；同時(shí)加大通風(fēng)量（內(nèi)循環(huán)無用，盡可能外循環(huán)）；待污染區(qū)域及設(shè)備器件清理完成后，常用設(shè)備和操作臺(tái)面使用移動(dòng)紫外消毒車近距離輻照1小時(shí)；實(shí)驗(yàn)室內(nèi)則使用室內(nèi)紫外燈整晚輻照。步驟（1）-（6）必須堅(jiān)持每天進(jìn)行，確保消除實(shí)驗(yàn)室污染。

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